Seit der Entdeckung des HI-Virus stellt das spezifische Targeting infizierter Zellen eine der größten Herausforderungen dar. Antiretrovirale Therapie ist mittlerweile in der Lage, die Verbreitung des Virus im Patienten zu inhibieren und die Viruslast unter dem Detektionslimit zu halten. Allerdings bleibt das latente Virusreservoir trotz intensiver Therapie bestehen und be-ginnt mit der Produktion neuer infektiöser Partikel, sobald die Medikation eingestellt wird. Dau-erhafte antiretrovirale Therapie ist jedoch kostenintensiv, verursacht häufig starke Nebenwirkungen und bedarf einer engmaschigen Überwachung der Patienten. Rückfälle aufgrund von Virusmutationen können auch mehrfach Änderungen der Medikationsstrategie erforderlich machen. Um eine nachhaltige Heilung zu erreichen ist es daher essentiell, auch das latente virale Reservoir vollständig zu auszulöschen. Die Therapie mit Chimeric Antigen Receptor (CAR)-T Zellen ist derzeit äußerst erfolgreich in der Behandlung von Blutkrebs. Autologe T-Zellen von Patienten werden hierfür genetisch modifiziert um einen chimären Rezeptor zu exprimieren, der diese dazu befähigt, spezifisch an ihr Zielantigen zu binden und die Zielzelle zu zerstören, ohne dass das Zielantigen dafür auf dem MHC-Komplex präsentiert werden muss. Die Über-tragung dieser CAR-T-Zell-Technologie von der Behandlung maligner B-Zellen auf HIV-infizierte T-Zellen könnte potentiell der Weg zu einer vollständigen Heilung sein. Allerdings ist die Entwicklung von anti-HIV CAR-T-Zellen in den letzten Jahren kaum vorangeschritten. Gründe hierfür waren vor allem mangelnde Effizienz, sowie der Umstand, dass das Ansteuern viraler Proteine auf der Oberfläche infizierter Zellen das latente virale Reservoir nicht ein-schließt. Verglichen mit herkömmlicher antiretroviraler Therapie ergab sich dadurch kein nen-nenswerter Vorteil der CAR-T-Zellen. Mit der Entwicklung von CARs fortgeschrittener Generationen, wurden Wirksamkeit und Spezifität enorm verbessert. Zusätzlich dazu, könnte die Wahl eines zellulären statt eines viralen Zielproteins möglicherweise auch das latente virale Reser-voir eliminieren. Weil CD4 der exklusive Eintrittsrezeptor für HIV in die Wirtszelle ist und somit alle infizierten Zellen, inclusive des latenten Reservoirs, CD4 exprimieren, könnte dieser ein passendes Zielantigen für anti-HIV CAR-T-Zellen sein. Ein Ziel dieser Dissertation war es, herauszufinden ob CAR-T-Zellen in der Lage sind, ihre CD4-positive Zielzellpopulation effizient zu depletieren. Hierfür wurde ein CAR der zweiten Generation mit CD3zeta- und CD28 Co-Aktivierungsdomäne genutzt, wie auch in verschiedensten erfolgreichen klinischen Studien. Ein CD4-spezifisches Designed Ankyrin Repeat Protein (DARPin) wurde als Bindedomäne eingesetzt. Dieses Molekül gilt als klein, gut auf Zelloberflächen zu exprimieren, spezifisch und nicht immunogen. Die Herstellung eines Ex-pressionsplasmids, welches alle CAR-Domänen in einem Kassettensystem codiert, lieferte die Plattform für flexibles und individuelles Design verschiedener CARs. Transduktion primärer humaner T-Zellen mit Gamma-Retroviralen Transfervektorpartikeln führte schließlich zur CAR-Expression auf deren Zelloberfläche. Co-Kultivierung führte zu dosisabhängiger, CAR-vermittelter T-Zell-Aktivierung und Zytotoxizität gegenüber antigen-positiven, nicht aber ge-genüber antigen-negativen Zielzellen. Somit konnten Spezifität und Wirksamkeit von anti-CD4-DARPin CAR-T-Zellen verifiziert werden. Eine hohe Effizienz zeigte sich auch während der Kultivierung mit antigen-negativen Zellen, denen antigen-positive Zielzellen in abnehmender Konzentration beigefügt wurden. CD4-spezifische Zytotoxizität war auch dann noch gegeben, wenn die Zielzellen nur in sehr geringer Menge vorhanden waren. Humanes CD4 wurde als Zielantigen ausgewählt, weil es als Eintrittsrezeptor in die Wirtszelle fungiert und somit auf allen HIV-positiven Zellen exprimiert wird, unabhängig von deren Aktivierungszustand. Ein weiteres Ziel dieser Arbeit war daher, festzustellen ob CD4-spezifische CAR-T-Zellen in der Lage sind, mit der CD4-positiven Zellpopulation auch das latente virale Reservoir zu depletieren. Anti-CD4-DARPin CAR-T-Zellen zeigten effiziente und wirksame Zytotoxizität gegenüber einem HIV-Latenzmodell – sowohl im aktivierten, als auch im latenten Zustand mit geringer Antigenexpression. Darüber hinaus wurden auch autologe CD4 T-Zellen effizient depletiert, ohne erkennbare Auswirkungen auf die CD4-negative T-Zellpopulation. Insgesamt zeigten anti-CD4-DARPin CAR-T-Zellen Spezifität, Effizienz und Wirksamkeit – die Haupteigenschaften für eine erfolgreiche CAR-T-Zell-Therapie. Um diesen Ansatz in einem immunkompetenten Tiermodell weiter zu untersuchen, wurden anti-CD4-DARPin CARs nicht nur in humanen, sondern auch in T-Zellen von nicht-humanen Primaten exprimiert. Autologe CD4-Zielzellen von Rhesusaffen wurden im mittleren Maße depletiert und dienen als Grundlage, um diesen Ansatz in einem etablierten immunkompetenten Tiermodell zu testen. Die Ergebnisse dieser Dissertation zeigen, dass anti-CD4-DARPin CAR-T-Zellen ein vielversprechender Ansatz sind, gezielt potenzielle HIV Wirtszellen zu depletieren und dabei auch latent infizierte Zellen zu eliminieren. Dies wurde erreicht durch die Kombination eines potenten CAR der zweiten Generation, welcher T-Zellen effizient mittels einer gut exprimierten DARPin-Bindedomäne aktiviert. Gleichzeitig werden durch das Ansteuern eines zellulären Zielproteins alle potenziell HIV-positiven Zellen erfasst, inklusive derer, die sich im Stadium der Latenz befinden. Diese Daten bieten eine Grundlage zur weiteren Erforschung von anti-CD4-DARPin CAR-T Zellen zur Behandlung von HIV.