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Isolierung und Charakterisierung von Einzeldomänen-Antikörpern durch mikrobielle Oberflächenpräsentation molekularer Bibliotheken

Steinmann, Björn (2015)
Isolierung und Charakterisierung von Einzeldomänen-Antikörpern durch mikrobielle Oberflächenpräsentation molekularer Bibliotheken.
Technische Universität Darmstadt
Dissertation, Erstveröffentlichung

Kurzbeschreibung (Abstract)

Die Dissertationsschrift umfasst die Arbeiten zur Erstellung und Durchmusterung von kameliden VHH-Antikörperbibliotheken (variable chain of a heavy-chain of a heavy-chain antibody) aus Lama glama mittels Phagen- und Hefe-Oberflächenpräsentation. Dabei werden zunächst die Probenentnahme am Versuchstier, die Aufbereitung der Blutproben sowie die Extraktion der genetischen Information für das VHH-Antikörperrepertoire beschrieben. Durch Anwendung geeigneter Klonierungs- und Rekombinations-Methoden konnten daraus erfolgreich verschie-dene VHH-Antikörper-Plattformen erstellt werden. Dabei wurde sowohl ein naives VHH-Repertoire aus einer Population von adulten Tieren, als auch ein durch Immunisierung affini-tätsgereiftes Repertoire eines einzelnen Tieres eingesetzt und bezüglich ihres Potentials, anti-genspezifische VHH-Antikörper isolieren zu können, untersucht. Beide Repertoires wurden in eine Hefe-Durchmusterungsplattform integriert und mehrfach erfolgreich nach Bindemolekülen durchmustert. Das naive Repertoire wurde zusätzlich für die Erstellung einer Phagen-Bibliothek eingesetzt und ebenfalls erfolgreich für die Durchmusterung eingesetzt.

Typ des Eintrags: Dissertation
Erschienen: 2015
Autor(en): Steinmann, Björn
Art des Eintrags: Erstveröffentlichung
Titel: Isolierung und Charakterisierung von Einzeldomänen-Antikörpern durch mikrobielle Oberflächenpräsentation molekularer Bibliotheken
Sprache: Deutsch
Referenten: Kolmar, Prof. Dr. Harald ; Neumann, Prof. Dr. Siegfried ; Göringer, Prof. Dr. H. Ulrich ; Layer, Prof. Dr. Paul G.
Publikationsjahr: 2015
Datum der mündlichen Prüfung: 15 Dezember 2014
URL / URN: http://tuprints.ulb.tu-darmstadt.de/4402
Kurzbeschreibung (Abstract):

Die Dissertationsschrift umfasst die Arbeiten zur Erstellung und Durchmusterung von kameliden VHH-Antikörperbibliotheken (variable chain of a heavy-chain of a heavy-chain antibody) aus Lama glama mittels Phagen- und Hefe-Oberflächenpräsentation. Dabei werden zunächst die Probenentnahme am Versuchstier, die Aufbereitung der Blutproben sowie die Extraktion der genetischen Information für das VHH-Antikörperrepertoire beschrieben. Durch Anwendung geeigneter Klonierungs- und Rekombinations-Methoden konnten daraus erfolgreich verschie-dene VHH-Antikörper-Plattformen erstellt werden. Dabei wurde sowohl ein naives VHH-Repertoire aus einer Population von adulten Tieren, als auch ein durch Immunisierung affini-tätsgereiftes Repertoire eines einzelnen Tieres eingesetzt und bezüglich ihres Potentials, anti-genspezifische VHH-Antikörper isolieren zu können, untersucht. Beide Repertoires wurden in eine Hefe-Durchmusterungsplattform integriert und mehrfach erfolgreich nach Bindemolekülen durchmustert. Das naive Repertoire wurde zusätzlich für die Erstellung einer Phagen-Bibliothek eingesetzt und ebenfalls erfolgreich für die Durchmusterung eingesetzt.

Alternatives oder übersetztes Abstract:
Alternatives AbstractSprache

The thesis investigates the generation and screening of camelid VHH antibody libraries (variable chain of a heavy-chain of a heavy-chain antibody) from Lama glama by phage and yeast display. First, the blood sample collection, the sample processing, and the extraction of the genetic information for the VHH antibody repertoire has been described. By using appropriate cloning and recombination methods, different VHH antibody platforms were generated. Therefore, a naïve as well as an immune maturated repertoire has been used. Both repertoires were integrated into a yeast display platform and successfully screened several times for target specific binding molecules. The naïve repertoire was also used for the generation of a phage display library, which has also been screened successfully for antigen-specific VHH molecules.

Englisch
URN: urn:nbn:de:tuda-tuprints-44026
Sachgruppe der Dewey Dezimalklassifikatin (DDC): 500 Naturwissenschaften und Mathematik > 500 Naturwissenschaften
500 Naturwissenschaften und Mathematik > 570 Biowissenschaften, Biologie
Fachbereich(e)/-gebiet(e): 07 Fachbereich Chemie
Hinterlegungsdatum: 01 Mär 2015 20:55
Letzte Änderung: 01 Mär 2015 20:55
PPN:
Referenten: Kolmar, Prof. Dr. Harald ; Neumann, Prof. Dr. Siegfried ; Göringer, Prof. Dr. H. Ulrich ; Layer, Prof. Dr. Paul G.
Datum der mündlichen Prüfung / Verteidigung / mdl. Prüfung: 15 Dezember 2014
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